液相色譜儀是一類分離與分析技術,其特點是以液體作為流動相,固定相可以有多種形式,如紙、薄板和填充床等。在色譜技術發(fā)展的過程中。為了區(qū)分各種方法,根據(jù)固定相的形式產(chǎn)生了各自的命名,如,紙色譜、薄層色譜和柱液相色譜。
液相色譜儀的要求
1、流動相必須用HPLC級的試劑,使用前過濾除去其中的顆粒性雜質和其他物質(使用0.45μm或更細的膜過濾)。
2、流動相過濾后要用超聲波脫氣,脫氣后應該恢復到室溫后使用。
3、不能用純乙腈作為流動相,這樣會使單向閥粘住而導致泵不進液。
4、使用緩沖溶液時,做完樣品后應立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時,然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上,以充分洗去離子。對于柱塞桿外部,做完樣品后也必須用去離子水沖洗20mL以上。
5、長時間不用儀器,應該將柱子取下用堵頭封好保存,注意不能用純水保存柱子,而應該用有機相(如,甲醇等),因為,純水易長霉。
6、每次做完樣品后應該用溶解樣品的溶劑清洗進樣器。
7、液相色譜儀不能進蛋白樣品,血樣、生物樣品。
8、堵塞導致壓力太大,按預柱→混合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥檢查并清洗,清洗方法:
①以異丙醇作溶劑沖洗;
②放在異丙醇中間用超聲波清洗;
③用10%稀硝酸清洗;
9、氣泡會致使壓力不穩(wěn),重現(xiàn)性差,所以在使用過程中要盡量避免產(chǎn)生氣泡。
10、如果進液管內不進液體時,要使用注射器吸液:通常在輸液前要進行流動相的清洗。
11、要注意柱子的pH值范圍,不得注射強酸強堿的樣品,特別是堿性樣品。
12、更換流動相時應該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動邊靖洗,TVOC分析儀然后插入新的流動相中。更換無互溶性的流動相時要用異丙醇過渡一下。